Amélioration des antibiotiques par génie métabolique

C’est une amélioration des potentialités d’une cellule par la manipulation de fonctions enzymatiques bien ciblées, c’est tout à fait grâce à la technologie de l’ADN recombiné. Cette étude repose sur la connaissance précise des fonctions cellulaires à modifier, ainsi les gènes associés, afin de pouvoir réaliser des manipulations des gènes de structure du métabolisme primaires et des gènes de régulation.

Le premier pat consiste à identifier la ou les étapes enzymatiques à modifier, pour espérer atteindre le but recherché Pour la production d’ATB les cibles sont: l’intermédiaire, les précurseurs du métabolisme I aire, les antibiotiques, produits de dégradation.

Cependant, il est possible d’accroître le titre intracellulaire des précurseurs de l’ATB issu du métabolisme primaire :

en modifiant certaines activités enzymatiques du métabolisme I aire,
en accroissant la concentration intracellulaire de l’enzyme responsable à la résistance contre l’ATB, la souche supportera des concentrations intracellulaires plus élevées de l’ATB ce qui induit une augmentation de la production
une amplification des gènes codant pour les protéines évacuant l’ATB par translocation vers l’extérieur (P. membranaires de transport); conduit à une amélioration de la production de l’ATB.

L’extraction primaire de l’antibiotique

A partir de la culture, s’il n’y a pas eu de séparation préalable de phases liquide solide – liquide une extraction par un solvant approprié est effectuée après traitement par un acide ou une base pour obtenir la forme ionique de l’ATB;

Les critères du choix du solvant sont:

Sa capacité à solubiliser l’ATB (un bon coefficient de partage entre l’eau et le solvant)
Sa neutralité chimique vis-à-vis le produit (faible dégradation)
Un bon degré de sélectivité (moindre d’extraction d’impuretés)
Un coût modéré
Des propriétés physiques facilitant son élimination ou sa réutilisation

N.B: pour les extractions: liquide – liquide le solvant ne doit pas être miscible à l’eau, cette étape est donc difficilement applicable à des molécules très hydrophiles, dans ce cas il peut être préférable d’envisager
directement les étapes de purification.